VDRL/RPR Test

Venereal Disease Research Laboratory (VDRL) / Rapid Plasma Reagin (RPR) non-treponemal microflocculation Test  है जिसका प्रयोग Syphilis नामक  Disease  की जाँच के लिए करते है जो Treponema pallidum नाम के  spirochete  के द्वारा फैलता है जो कि एक सर्पिलाकार (Spiral in Shape) जीवाणु है।  

Methods –

1. Slide Qualitative Test
2. Test Tube Quantitative Test

Requirements –

• Slide
• Test Tube
• VDRL Test Kit
• Normal Saline or buffer
• Slide Rotator 

Principle –

VDRL Reagent  में मौजूद Cardiolipin Lecithin Cholesterol Antigen, Specimen  में उपस्थित Reagin  के साथ Reaction करता है जिसके फलस्वरुप   Reagent  में उपस्थित carbon particles  का co-agglutination  Reaction और  Flocculation होता है जिसे microscope  की सहायता से Observe किया  जाता है।

1) Procedure of Slide Qualitative Test –

• सबसे पहले VDRL antigen Suspension, controls  और  Specimen  को Room Temperature पर रखते हैं।
• अब Cotton  की सहायता से स्लाईड को साफ कर लेते है।
• अब पहले Circle  में  Serum,  दूसरे Circle   में  Positive Control  तीसरे Circle   में Negative Control  की एक एक बूँद डालते है।
• अब तीनों  Circle  में  VDRL Antigen  की एक एक बूँद डालते है और अच्छे से मिलाते है।
• अब slide को manually या mechanical rotor की सहायता से 180 r.p.m. पर Rotate करते है।
• अब लगभग 8 मिनट बाद macroscopically, flocculation को Observe करते है।

Result –

• Reactive: Indicated by large or small aggregates in the center or the periphery of the test circle.
• Non-reactive: Indicated by a smooth, even light gray appearance with no aggregates visible.

2) Procedure of Test Tube Quantitative Test –

• सबसे पहले 10 छोटे साफ व सूखे टेस्ट ट्यूब लेते है।
• अब Pipette की सहायता से इन सभी Tubes में 500µl  नार्मल सलाईन ले लेते हैं।
• अब Pipette की सहायता से पहले Test Tube में 500µl  सीरम लेते है और अच्छे से मिलाते है इस प्रकार पहले Test Tube में 1:2 Mixture तैयार हो जाता है।
• अब Pipette की सहायता से पहले Test Tube में से 500µl Mixture निकाल कर दूसरे Test Tube में लेते है और अच्छे से मिलाते है, यह प्रक्रिया दसवें Test Tube तक चलती है और अन्त में बचे 500µl Mixture को फेंक देते है।
• अब सभी Test Tubes में से 50 µl या 1 Drop Mixture Solution Slide के अलग अलग  Circles  में  लेते हैं और उसमें अच्छी तरह से VDRL Antigen मिलाते है ।
• अब slide को manually या mechanical rotor की सहायता से 180 r.p.m. पर Rotate करते है।
• अब लगभग 8 मिनट बाद macroscopically, flocculation को Observe करते है।

Result –
       
Test Tube -           1    2      3     4      5      6       7       8        9     10

  Eq.Tube Titer - 1:2,    1:4,    1:8,   1:16,  1:32 ,  1:64,  1:128,  1:256,  1:512,  1:1024

1. यदि Test Tubes 1 में Agglutination Reaction है तो reading 1:2 होगी।
2. यदि Test Tubes 2 में Agglutination Reaction है तो reading 1:4  होगी।
3. यदि Test Tubes 3 में Agglutination Reaction है तो reading 1:8  होगी।
4. यदि Test Tubes 4 में Agglutination Reaction है तो reading 1:16  होगी।
5. यदि Test Tubes 5 में Agglutination Reaction है तो reading 1:32  होगी।
6. यदि Test Tubes 6 में Agglutination Reaction है तो reading 1:64  होगी।
7. यदि Test Tubes 7 में Agglutination Reaction है तो reading 1:128  होगी।
8. यदि Test Tubes 8 में Agglutination Reaction है तो reading 1:256  होगी।
9. यदि Test Tubes 9 में Agglutination Reaction है तो reading 1:512  होगी।
10. यदि Test Tubes 10 में Agglutination Reaction है तो reading 1:1024  होगी।

!!Thank You!!