Introduction :-
Reticulocytes young और immature red blood cells है जो की bone marrow से निकलते है जिसमे राइबोनुक्लिक एसिड (RNA) और Ribosomes के अवशेष पाए जाते है। यह एक अपरिपक्व रक्त कोशिका है इसमें केन्द्रक (Nucleus) नहीं होता है।
Principle :-
ब्लड की कुछ ड्रॉप्स लेकर new methylene blue सलूशन में मिक्स करके incubate करते है जिससे RNA के granules लाल रंग की कोशिका के रूप में stain हो जाते है। मिक्स सलूशन से glass slide पर एक thin स्मीयर बनाते हैं और microscope के द्वारा reticulocyte को count करते हैं। Reticulocyte के संख्या को प्रतिशत में व्यक्त किया जाता है।
Reagent :- New methylene solution निम्नवत तैयार करते है -
- New methylene blue - 1 gm
- Sodium Citrate - 0.6 gm
- Sodium Cloride - 0.7 gm
- Distilled Water - 100 ml
Reagent को रेफ्रिजरेटर में 2 - 6 digree celcius temprature पर रखना चाहिए और उपयोग करने से पहले इसे छान लेना चाहिए।
Procedure :-
- सबसे पहले एक साफ़ और सूखा टेस्ट ट्यूब लेते हैं और उसमें 1 - 2 drop EDTA blood sample लेते हैं ।
- अब इसमें 1 - 2 drop New methylene blue के add करते हैं और इसे अच्छे से मिक्स कर लेते है।
- अब इस मिक्सचर को 15 मिनट तक रूम टेम्प्रेचर पर incubate करते है।
- Incubate होने के बाद एक ग्लास स्लाइड पर इसकी एक thin smear बनाते हैं। ( जिस प्रकार लिशमैन स्टैनिंग के लिए स्मीयर बनाते है उसी प्रकार) Making Blood Smear.
- स्मीयर जब सूख जाता है तब उसे माइक्रोस्कोप के द्वारा examine कर लेते हैं।
Reporting the Result -
Reticulocyte % = NR X 100 / NRBC
NR = No. of Reticulocyte counted. NRBC = No. of RBC counted.
Referance Range :-
0.5% - 2.5%
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