Estimation of Hemoglobin by Sahali's Method

हीमोग्लोबिन एक Protein Molecule है जो कि लाल रक्त कोशिकाओं में  उपस्थित रहता है। यह आँक्सीजन को फेफड़ों से शरीर के ऊतकों तक पहुँचाती है और बदले में कार्बन डाई आँक्साइड को ऊतकों से फेफड़ों तक पहुँचाती है।

हीमोग्लोबिन चार Protein Molecules (Globulin Chains) से मिलकर बना होता है जो आपस में परस्पर जुड़े होते है। Normal Adults के हीमोग्लोबिन Molecules में 2-Alpha – Globulin Chains and 2-Beta – Globulin Chains  मौजूद होते है। जबकि Fetuses and Infants  में 2-Alpha – Globulin Chains and 2-Gamma– Globulin Chains मौजूद होते है।

Principle – 

 Blood Sample  और N/10  HCl को Graduated Hemoglobin Tube में Add करते है और 8-10 minute के लिए Room Temperature पर Incubate करते है जिससे Blood और N/10  HCl , Reaction करके Acid-Hematin  में बदल जाती है। अब इस Acid-Hematin के Color  को Hemoglobinometer  के किनारों पर मौजूद comparator  (Browne colored Glass)  के Color से match कराते है और जब तक Color match नहीं हो जाता तब तक Acid Hematin  में Distilled Water Add  करते रहते है और जब Color match हो जाता है तब Graduated Hemoglobin Tube  को Measure  करके Reading  ले ली जाती है।

Requirement –

• Sahali’s Hemoglobinometer
• Graduated Hemoglobin Tube
• Haemoglobin Pipette
• Stirrer (Thin Glass Rod)
• N/10 HCL
• Distilled Water
• EDTA Blood or Capillary Blood 

 

Procedure –

• सबसे पहले Graduated Hemoglobin Tube में N/10 HCl को Tube में 2% Mark तक भरते है।
• अब इसमें Haemoglobin Pipette की सहायता 20µl  Mark तक EDTA Blood or Capillary Blood लेकर Graduated Hemoglobin Tube में उपस्थित N/10 HCl में मिलाकर Stirrer से अच्छे से Mix कर देते हैं।

  

  Blood Mixing in N/10 HCl
• अब इसे 8-10 मिनट तक Room Temperature पर रखते है जिससे Blood और HCl में Reaction होता है और अब यह Reaction Mixture Acid Hematin कहलाता है।

 

Wait 8-10 Minute

• अब इसमें Dropper की सहायता से Drop by Drop Distilled Water Add करते जाते हैं और Hemoglobinometer  के किनारों में मौजूद Standard Comparator (Brown Colored Glass) से Color को Match कराते है।
• Color Match हो जाने के बाद Graduated Hemoglobin Tube पर मौजूद Reading को देखकर Reading / Result दे देते हैं।

Measured Directly by Tube

Normal Value of Hemoglobin –

• In Men          =   13-17 g/dl

• In Women    =   12-15 g/dl

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